赛默飞TSQ Quantiva三重四级杆液质联用仪使用流程及注意事项
一、使用流程
1. 开机准备
气源与电源:
打开氮气钢瓶(分压0.55~0.65 MPa)和氩气钢瓶(分压0.135 MPa),确保气体压力稳定。
检查机械泵油量(油面需在视窗1/2以上),并开启稳压电源及UPS电源(零地电压需<1V)。
环境控制:
实验室温度保持在18~25℃,开启排风系统,避免湿度过高。
2. 系统启动
真空系统:
打开质谱主机电源(Main Power),机械泵启动后,用隔热密封垫堵住离子传输毛细管,抽真空约12小时(或隔夜)。
真空达标后(前级压<4.5Torr,离子规压力<9e-6Torr),移除密封垫,开启电子开关(Electronics)至Operational状态。
液相系统:
打开液相泵、自动进样器及柱温箱电源,设定流速(0.2~0.4 mL/min)和柱温(30~40℃),平衡色谱柱。
3. 参数设置与样品分析
质谱参数:
喷雾电压(正离子3500V,负离子2500V)、鞘气(30~40AU)、辅助气(5~15AU)、毛细管温度(300~350℃)。
样品进样:
样品需用0.2 μm滤膜过滤,流动相需现配并超声脱气(缓冲盐浓度建议≤10 mmol/L)。
进样前运行空白流动相(不含盐或酸)清洗管路,避免交叉污染。
4. 数据采集与关机
数据监控:
通过Tune软件实时观察离子流信号及真空状态,调整曝光时间或增益以优化信噪比。
关机步骤:
1. 运行洗柱程序(流动相切换至纯水/甲醇),降低泵流速至0。
2. 将质谱切换至Standby状态,关闭电子开关,2分钟后关闭主机电源。
3. 关闭液相模块、UPS及气源阀门,登记使用记录。
二、注意事项
1. 气体与真空系统维护
气体压力:氮气分压需严格控制在0.55~0.65 MPa,氩气分压0.135 MPa,避免压力波动导致喷雾不稳定。
真空维护:
每15天运行机械泵“震气”15分钟,每半年或5000小时更换机械泵油。
真空未达标时禁止开启质谱扫描,避免污染离子源。
2. 样品与流动相要求
样品处理:
含高盐或去垢剂的样品需彻底透析或稀释,避免盐结晶堵塞毛细管。
化学发光样品需充分洗涤未结合抗体,减少背景信号。
流动相:
水相需每日更换,有机相使用HPLC级溶剂,酸/碱添加剂需色谱纯。
3. 安全操作规范
防护措施:操作时佩戴手套及护目镜,及时清洁台面。
电源管理:断电后需等待10分钟再重启,避免电路板损坏。
4. 定期维护与校准
离子源清洁:每1~2个月清洗离子传输毛细管(降温至100℃以下操作)。
系统校准:定期使用标准品(如调谐液)校准质量轴和灵敏度,确保数据准确性。
总结
TSQ Quantiva的核心操作需严格遵循气体压力控制、真空系统维护及样品预处理规范。其优势在于高灵敏度的化学发光检测与灵活的质谱参数调节,适用于蛋白质组学、代谢物分析等复杂场景。建议结合原厂手册制定实验室SOP,并定期联系技术支持(400-650-5118)进行专业维护。