资产编号 2013004419

仪器名称
高效液相色谱ULtimate3000  状态【在用
英文名称 HPLC
规格/型号 *台/ Thermo Utimate3000 
生产厂商 美国赛默飞世尔
国别 美国
所属单位 生物医药研究院>>10楼1006 放置地点 10楼1006(10楼1006)
负责人 邮箱:暂无
桂利利 联系电话:15972598396 邮箱:1065286178@qq.com
使用日期 2021/1/29 电子邮箱
单价 485400.0000
收费标准 计时标准:按预约时间
基础费率:
1:

性能指标


赛默飞UltiMate3000高效液相色谱仪的性能指标综合如下,结合多份技术文档及实际应用场景:

一、泵系统与流动相控制

1.  流速与压力范围   

      流速范围 0.00110.000 mL/min(常规分析)至50.000 mL/min(制备型) 

      压力范围 :标准系统最大耐压62 MPa620 bar),超高效版本支持1034 bar15,000 psi)。 

      流速精度 <0.05% RSD,梯度混合精度±0.15%

2.  流动相兼容性   

     支持二元、四元及双三元泵配置,可并联或串联使用,实现多维液相分析。 

     自动补偿流动相压缩性变化,确保梯度稳定性。

二、检测器性能

1.  紫外-可见检测器(VWD/DAD   

     波长范围:190900 nm,波长精度±0.1 nm 

     数据采集频率:100 Hz(常规)至200 Hz(超高效模式),兼容快速峰形捕捉。 

     基线噪声:<±2.5 μAU254 nm),基线漂移<0.1 mAU/h

2.  荧光检测器(FLD   

     激发波长:200630 nm,发射波长:265650 nm,灵敏度达0.1 ng/mL 

     适用于痕量分析(如氨基酸、多环芳烃)。

3.  电喷雾式检测器(CAD   

     通用型检测器,支持非挥发性/半挥发性物质,兼容梯度洗脱,数据采集率100 Hz

   三、温控与自动化

1.  柱温箱   

     温控范围:580℃,精度±0.1℃,支持630 cm色谱柱同时控温。 

     内置湿度/气体传感器,具备防误开门和漏液监测功能。

2.  自动进样器   

     进样体积:0.012500 μL(制备型),准确度±0.5%,交叉污染率0.004% 

     支持在线稀释、衍生及防沉淀振摇,兼容120位样品盘。

   四、系统兼容性与扩展性

1.  色谱柱与管路   

     适配小颗粒填料(如1.7 μm)色谱柱,支持超高效分离。 

     Viper手旋接头系统:零死体积设计,耐高压且易拆卸。

2.  软件与数据处理   

      变色龙软件(Chromeleon :支持方法开发、多仪器联动控制及合规性审计,可导出PDF/Excel报告。 

     eWorkflow功能:简化序列建立,自动生成分析方案。

总结

UltiMate3000的核心优势在于 高耐压(至1034 bar)、宽流速范围(纳升至制备级)及多检测器兼容性 。其模块化设计支持从常规分析到超高效液相的灵活切换,结合智能化软件和低交叉污染进样系统,显著提升复杂样品的分析效率与准确性。具体参数需根据配置模式(如标准型、双三元或超高效版本)选择。


主要应用

赛默飞UltiMate3000高效液相色谱仪的应用领域广泛,结合其高性能和灵活性,主要覆盖以下方向:

一、制药与生物制药

1.  药物开发与质控   

用于药物成分(如原料药、制剂)的定性与定量分析,支持高通量筛选和杂质检测。 

在代谢组学、蛋白质组学研究中,分析复杂生物样本(如血浆、组织提取液)中的活性物质。 

2.  生物制剂分析   

支持单克隆抗体、重组蛋白等大分子药物的分离与表征,兼容高灵敏度的紫外/质谱联用技术。

二、食品安全与营养研究

1.  食品添加剂与污染物检测   

检测食品中的添加剂(如防腐剂、色素)、农药残留及非法添加物(如三聚氰胺),满足法规合规性要求。 

2.  真伪鉴别与营养分析   

通过指纹图谱对比,鉴别食品原料真伪(如橄榄油掺假);分析保健品中的活性成分(如维生素、多肽)。

三、环境监测

1.  污染物检测   

分析水、土壤及大气中的有机污染物(如多环芳烃、农药残留)和微塑料,灵敏度可达痕量级别。 

2.  生态毒理研究   

支持环境样本中新型污染物的筛查与毒性评估,如抗生素抗性基因代谢产物。

四、化学与化工

1.  化学品开发   

用于有机合成中间体、高分子材料的纯度分析,支持高温(≤110℃)和高压(≤1250 bar)条件下的分离。 

2.  工业质控   

在石油化工、化妆品行业中对原料及成品进行质量控制(如表面活性剂、香料成分分析)。

五、学术研究与生命科学

1.  复杂样品分析   

适用于未表征样品的超高分辨率分离,如代谢物、天然产物提取物等,支持二维色谱和在线固相萃取技术。 

2.  基础研究工具   

在蛋白质折叠、酶动力学等研究中提供精准数据,搭配电雾式检测器(CAD)实现非紫外活性物质的定量。

总结   

UltiMate3000凭借 高耐压(至1250 bar)、多检测器兼容(紫外/DAD、荧光、质谱等)及智能化软件 ,成为跨领域复杂样品分析的优选设备。其核心优势包括: 

制药领域 :高通量筛选与高灵敏度质谱联用; 

环境与食品 :痕量污染物检测与真伪鉴别; 

科研创新 :支持多维色谱和高级应用开发(如在线SPE-LC)。 

样品要求 高效液相色谱仪的检测器是紫外检测器,首先要保证样品具有紫外吸收,另外样品在进行检测前还要配制成一定浓度的溶液(配制溶液的时候需根据样品的溶解度情况选择合适的溶剂,为了减小溶剂峰,通常使用流动相作为溶剂,样品溶液的浓度一般配制成10ug/ml),样品溶液在进样前还要进行一下过滤(通常采用0.22um或0.45um的针头式过滤器)。


赛默飞UltiMate3000高效液相色谱仪的样品要求如下(综合多份技术文档及操作规范):
一、溶解性与纯度
1.
溶解性  
 
样品需 完全溶解于流动相 ,确保无沉淀或悬浮颗粒,避免堵塞色谱柱或管路。建议使用色谱纯级试剂配制流动相,若使用缓冲盐(如磷酸盐),需确保盐浓度≤20 ppm,且流动相需过滤(0.45 μm滤膜)并脱气。
 
禁忌 :含高浓度难挥发酸(如磷酸、硫酸)及其盐的样品,可能导致系统腐蚀或堵塞。

2. 纯度要求  
 
避免含 无机纳米颗粒 、不溶性杂质或强吸附性成分(如聚合物、脂类),建议通过离心或过滤(0.22 μm滤膜)预处理。
 
生物样品(如血浆、组织提取液)需去除蛋白质干扰(如乙腈沉淀法)。

  二、流动相与缓冲液
1.
流动相选择
 
流动相A瓶通常为水或稀酸(如0.1%甲酸),B/C瓶为色谱纯有机溶剂(如乙腈、甲醇),D瓶可为水或低浓度盐溶液。
 
若流动相含缓冲盐,需在分析后立即用 甲醇-水混合液 冲洗色谱柱,防止盐析出。

2. 缓冲盐限制  
 
避免使用高浓度(>50 mM)或难挥发盐(如硫酸铵),推荐使用挥发性缓冲盐(如乙酸铵)。

 三、进样与浓度
1.
进样体积
 
自动进样器支持 1–100 μL 进样量(具体取决于定量环配置),推荐进样量≤20 μL以降低柱压波动。
 
高浓度样品需稀释至检测线性范围内,避免超载导致峰形畸变。

2. 浓度限制  
 
样品浓度需适配检测器灵敏度(如紫外检测器适用于0.1–100 mg/mL),高浓度样品可能需在线稀释。

  四、特殊注意事项
1. pH
控制  
 
使用硅胶基质色谱柱(如C18)时,流动相pH应控制在 2.5–7.0 之间,防止硅胶溶解或键合相剥离。

2. 酸碱性样品处理  
 
酸性样品可添加1%醋酸抑制拖尾,碱性样品建议添加10–20 mM三乙胺改善峰形。

  总结
UltiMate3000
的核心样品要求为: 溶解充分、无腐蚀性、低盐/低颗粒物 。用户需根据检测目标优化流动相组成,严格执行预处理(过滤、脱气)和系统冲洗程序,以保障分析精度和仪器寿命。具体操作可参考赛默飞官方手册。


仪器说明


以下是赛默飞UltiMate3000高效液相色谱仪的使用流程及注意事项:

1. 准备工作

检查设备:检查设备电源、流路、信号连接是否完好。

准备流动相:按照分析方法配制相应的流动相,用0.45μm微孔滤膜抽真空过滤后,超声脱气15分钟。必须使用色谱纯的溶剂,水或缓冲盐溶液要用超纯水,盛放样品溶液和流动相所用的玻璃容器必须用超纯水清洗。

准备样品溶液:按方法取样或配制标准样品溶液,0.45μm滤膜过滤。

2. 开机与平衡系统

开启仪器:依次接通Ultimate3000分离单元、检测器、计算机和打印机的电源。接通Ultimate3000分离单元后,仪器开始自检约20s,打开电脑,双击电脑右下角的变色龙软件的服务管理器,单击启动 Chromeleon仪器控制器,激活服务管理器,双击电脑桌面的“ Chromeleon 7”图标,进入变色龙软件。

管路排气:向上掀开泵头前面板,拧松快速清洗阀(逆时针两圈左右),然后按冲洗键,泵将以3.0ml/min的速度自动快速清洗泵类残留的气泡,5min将自动停止。若想手动停止,只要再按冲洗键,将停止清洗。

安装色谱柱:注意安装方向,用滤纸检查是否漏液。

设置流动相比例:平衡色谱柱。

3. 编辑仪器方法

创建仪器方法 :在Chromeleon Console“创建菜单中点击仪器方法,设置采集时间和采集通道。

设置泵参数:在溶剂名称下面的方框中输入所用流动相的名字,设置压力限值,最大流速加速度和减速度等。

设置流速梯度 :在流速梯度窗口中,输入相应值。

设置自动进样器 :一般吸取速度设为2μl/s,吸取延迟为7s,排出速度为10μl/s,取样高度为2mm,进样冲洗设置为Before Inject,冲洗体积75μl,冲洗速度4μl/s

设置进样模式 :分析型液相色谱一般采用默认设置,低压梯度泵需勾选与泵同步进样

设置柱温箱:若需对色谱柱进行精确控温,则勾选使用温度控制,然后在温度后输入需要的温度值。

设置检测器 :二极管阵列检测器可以同时选择4个紫外通道采集数据,可以分别设定需要的检测波长,需要采集3D光谱时要选上3D FIELD,常规分析时可以选一个通道采集数据,一般参比波长选 FF,数据采集频率和相应时间可以通过勾选使用推荐值来设置。

4. 创建处理方法和报告模板

创建处理方法:在 Chromeleon Console“创建菜单中点击处理方法,选择基本定量,输入方法名称并保存。

创建报告模板:在 Chromeleon Console“创建菜单中点击报告模板,选择相应的检测器类型,输入报告模板名称并保存。

5. 创建序列文件

新建序列:在 Chromeleon Console“创建菜单的下拉菜单中点击序列,在弹出的新建序列向导页中,依次在进样名称的格式样品数进样次数开始位置进样量输入相应值,点击下一步。

选择方法和模板:点击浏览为新建的样品序列选择分析时所要采用的仪器方法、处理方法和报告模板。

保存序列:最后输入序列名称并选择保存路径,点击完成。

6. 样品分析

平衡仪器:测试样品前必须先平衡仪器,走稳仪器。点击 Chromeleon Console工具栏的监视基线,在弹出的选择监视通道窗口勾选所需的监视波长和通道,待基线平稳后(约20 30min),再次点击工具栏的监视基线立即停止采集。

自动进样器进样:在仪器状态栏新建右边点击开始进行样品分析。

手动进样阀进样:单击开始,将手动进样阀反时针扳到头之后,将样品用进样针注入定量环,注入完成后,将进样阀顺时针搬到头,即开始采集数据。

7. 数据报告打印

导出数据:在数据处理界面,右击已完成分析的样品,选择导出,在弹出的选项卡中依次选择报告模板路径和导出文件格式,点击确定即可。

8. 关机

冲洗系统:使用完毕后,按规定用适当的溶剂冲洗色谱柱、系统管路、自动进样器、进样针和柱塞杆密封垫。

智能关机:在序列的最后一个样品栏可设置关机程序,或手动依次关闭各单元电源,关闭计算机,填写仪器使用记录。

注意事项

1. 流动相准备 :流动相要使用0.45μm滤膜过滤除去微粒杂质后,超声脱气5分钟。甲醇、乙腈要使用色谱纯级别,配制缓冲盐溶液要用超纯水,夏天使用缓冲溶液作为流动相不要过夜。

2. 管路排气 :确保流动相应连续、无气泡。排气泡前要打开排气阀,排完后也要记得关。

3. 色谱柱安装 :安装好色谱柱,注意安装方向,用滤纸看看是否漏液。

4. 进样器清洗 :清洗进样器,灌注注射器,清洗缓冲环,清洗针等,最后进样针回到进样位置“T  Inject P siti n”

5. 样品处理 :样品溶液需用0.45μm滤膜过滤,确保样品纯净无杂质。

6. 维护保养 :定期检查设备的各个部件,确保其正常运行。定期清洗泵头和管路,防止堵塞。

7. 缓冲盐流动相使用 :使用了缓冲盐流动相之后,要先用纯水清洗色谱柱,然后再改成有机相清洗,防止盐与有机相混合产生结晶析出而堵塞色谱柱。因此,清洗柱子的方法用梯度洗脱,高比例水相如5% 10%甲醇溶液冲洗30min,然后改成100%甲醇冲洗45min

8. 检测器维护 :对于异常峰和方形峰以及噪声异常增大现象,表示光源灯已到极限,应更换并检查上述现象是否消失。若流动相被污染,也会出现异常峰和方形峰的情况。流动相内混有气泡可出现流动池内有气泡的现象,气泡去除方法:一面由泵送液,一面用手指紧压流动池出口的连接管,使池内增压,如此反复3 4次,气泡即可冲走。注意不应使流动池压力增加太多,以免破裂。流动池漏液或池出口反压过大,环境温度起落大(如直接有风吹在示差折光检测器上),都可能发生流动池漏液或压力异常。

9. 流动相与色谱柱维护

避免盐析与腐蚀:含缓冲盐的流动相不可过夜存放,使用后立即冲洗系统。强酸(pH2)或强碱(pH8)会破坏硅胶柱基质。

色谱柱保护:使用保护柱拦截杂质,定期反冲强溶剂(如异丙醇 二氯甲烷)清除污染物。保存时需充满乙腈或甲醇,禁止残留缓冲液。

10. 泵与检测器维护

泵头清洗:每周用稀硝酸超声清洗入口过滤头,避免颗粒堵塞。 

氘灯寿命管理:检测结束后及时关灯,避免频繁开关(间隔≥5分钟)。

11. 进样与样品处理

样品预处理:需完全溶解于流动相,过滤(0.22 μm)去除颗粒。生物样品需去蛋白(如乙腈沉淀法)。进样量控制:250×4.6 mm色谱柱的绝对进样量≤100 μg,避免超载导致峰畸变。

12. 环境与操作规范

温度与湿度:柱温箱控温误差±0.1,实验室湿度建议30–70% 

避免机械冲击:色谱柱安装需轻缓,禁止反冲(除非厂家允许)。

三、常见问题解决

基线漂移:检查流动相脱气是否充分或色谱柱污染,必要时冲洗柱。 

压力异常:可能因过滤头堵塞或色谱柱污染,需清洗或更换部件。 

峰形拖尾:酸性样品可添加1%醋酸,碱性样品添加10–20 mM三乙胺改善。

总结

UltiMate3000的操作核心在于 流动相规范处理、系统彻底冲洗及色谱柱保护 。严格遵循开机 平衡 进样 关机的流程,并定期维护泵、过滤器和检测器,可显著延长仪器寿命并保障数据准确性。具体细节可参考赛默飞官方手册或联系技术支持。




学习资料 U3000液相色谱仪简要操作规程培训.PDF