1. 灵敏度
定义:检测低浓度模板的能力。
衡量标准:通常以能够稳定检测到的最低模板浓度表示。
2. 特异性
定义:准确识别目标序列,避免非特异性扩增。
衡量标准:通过熔解曲线分析或凝胶电泳确认单一产物。
3. 重复性
定义:同一样本多次检测结果的一致性。
衡量标准:通过重复实验计算Ct值的标准差或变异系数(CV)。
4. 线性范围
定义:检测信号与模板浓度成线性关系的范围。
衡量标准:通过标准曲线评估,R2值越接近1,线性越好。
5. 扩增效率
定义:PCR反应的效率,理想值为100%。
衡量标准:通过标准曲线斜率计算,公式为:效率 = (10^(-1/斜率) - 1。
6. 动态范围
定义:能够准确定量的模板浓度范围。
衡量标准:通过标准曲线确定最低和最高可定量浓度。
7. 信噪比
定义:信号强度与背景噪声的比值。
衡量标准:信噪比越高,检测灵敏度越好。
8. 分辨率
定义:区分相似浓度模板的能力。
衡量标准:通过检测不同浓度样本的Ct值差异评估。
9. 稳定性
定义:实验条件变化时结果的稳定性。
衡量标准:在不同条件下重复实验,评估Ct值的一致性。
10. 交叉污染
定义:样本间或试剂间的污染程度。
衡量标准:通过阴性对照检测,确保无扩增信号。
11. 数据分析
定义:数据分析的准确性和可靠性。
衡量标准:使用合适的软件和分析方法,确保结果准确。